ПРИМЕНЕНИЕ СЕРЕБРОСОДЕРЖАЩЕГО СОРБЕНТА ПРИ ОСТРОМ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ВОСПАЛЕНИИ

Ю.И. Бородин, Т.И. Дергачева, А.В. Шурлыгина, Е.В. Кречетова, Л.В. Вербицкая, Л.Н. Рачковская, В.А. Бурмистров, А.П. Иванов

ГУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН

ЗАО НПЦ «Вектор-Инвест»

Несмотря на широкое применение антибактериальных препаратов, противовоспалительной и иммунокорригирующей терапии, воспалительные заболевания матки и придатков часто приобретают затяжное и в 70% случаев хроническое течение [7,8]. Высокая антибиотикорезистентность возбудителя, иммунодепрессивные свойства антибиотиков, нарушения микроэкологии и возрастание этиологической роли условно-патогенных микроорганизмов под влиянием антибиотикотерапии побуждают к поиску путей оптимизации лечебного процесса. Одним из перспективных методов санации внутренней среды организма через воздействие на лимфатическую систему является применение сорбентов в качестве лимфокорригирующих и лимфопротекторных средств Сорбенты осуществляют местную детоксикацию, повышают функциональную активность лимфоцитов и, тем самым, сокращают сроки лечения воспалительных процессов [1,2,9,12].

В связи с вышесказанным представляет интерес испытание нового сорбента с бактерицидными свойствами на основе механически прочной, высоко стандартизованной по текстуре минеральной матрицы – оксида алюминия и высокодисперсного комплекса серебра с полимерным лигандом поливинилпирролидоном. Это светло-бежевого цвета округлые гранулы с размером до 1 мм, с развитой мезо-, макропористой структурой, с преимущественным размером пор 100-1000 ангстрем и высокой удельной поверхностью до 300м²/г. Полимерный лиганд стабилизирует ионы серебра и одновременно, наряду с оксидом алюминия, формирует гидрофильно-гидрофобные центры на поверхности сорбента, что делает поверхность «мягкой» по отношению к биологическим объектам. Технология получения такова, что с поверхности комплекс серебра частично выходит в окружающую среду, обеспечивая бактерицидное действие. Сорбент на своей поверхности связывает токсины, микробные клетки и продукты распада, которые далее выводятся из организма. Сорбент обеспечивает стабильность рН среды, что обусловлено антацидными свойствами матрицы и полимера.

Цель данного исследования – оценка влияния серебросодержащего сорбента, включенного в комплексное лечение экспериментального воспаления половых органов у самок крыс, на состояние тканей очага воспаления.

Материал и методы

 Эксперимент проводили на 60 нелинейных белых крысах линии Wistar, массой тела 150-200гр. У 45 животных была создана модель воспаления внутренних половых органов, приближенная к клиническим условиям [4,5], 15 животных составили интактную группу. Животных с воспалением разделили на 3 группы, по 15 в каждой:1 группа “модель”-воспаление внутренних женских половых органов без лечения; 2 группа “антибиотик”-со вторых суток после индукции воспалительного процесса животным под слизистую оболочку влагалища вводили нетромицин в дозе 1 мг на 100 грамм веса 1 раз в сутки, в течение 3-х дней; 3 группа “антибиотик+сорбент”- со вторых суток после индукции воспалительного процесса крысам вводили под слизистую влагалища нетромицин в дозе 1мг на 100 грамм веса и во влагалище марлевый тампон с серебросодержащим сорбентом 1 раз в сутки, в течение 3-х дней. Животных забивали на 5-е сутки после индукции воспалительного процесса, что соответствовало острой фазе воспаления. Эксперимент выполнен с соблюдением принципов гуманности, изложенных в директиве Европейского сообщества (86/609/ЕС).

Ткани влагалища и маточного рога фиксировали в растворе Телесницкого. Морфологические исследования проводили с использованием точечного метода объемометрии, который заключается в наложении на срез сетки, состоящей из точек, и подсчете точек, лежащих в площади сечений анализируемых структур [14].

Производили измерение площади прелимфатических пространств в собственной пластинке слизистой и в мышечном слое влагалища и маточного рога под световым микроскопом с помощью морфометрической сетки при увеличении окуляра 7, объектив 40, в 6 полях зрения. Определяли плотность клеточной инфильтрации тканей в слизистом и мышечном слое влагалища и маточного рога крыс под световым микроскопом с использованием масляной иммерсии при увеличении окуляра 10, объектив 90. Для это-го на ограниченном участке поля зрения подсчитывали количество нейтрофилов, макрофагов, лимфоцитов и плазматических клеток, всего в 10 полях зрения. Статистическую обработку полученных результатов производили на персональном компьютере с использованием пакета программ «Statistica 5.0». Стандартная обработка вариационных рядов включала подсчет значений средних арифметических величин (М) и ошибок средних (m). Сравнение вариационных рядов осуществляли с помощью непараметрических и параметрических критериев. Корреляционный анализ проводили с помощью вычисления рангового коэффициента Спирмена (r).

Результаты и обсуждение

При остром воспалении (группа «модель») по сравнению с интактными животными достоверно (p<0,05) увеличилась площадь прелимфатических пространств в тканях влагалища и маточного рога (табл.1). У животных, получавших лимфотропно антибиотик (группа «антибиотик»), по сравнению с нелеченным воспалением площадь прелимфатических пространств достоверно (p<0,05) уменьшалась в мышечном слое влагалища. Лечение антибиотиком в сочетании с сорбентом (группа «антибиотик +сорбент») приводило к уменьшению площади прелимфатических пространств в тканях влагалища и маточного рога по сравнению с нелеченным воспалением и крысами, получавшими только антибиотик (табл. 1).

Плотность лейкоцитарной инфильтрации тканей влагалища при остром воспалении достоверно (p<0,05) увеличилась по сравнению с интактными животными. В слизистом слое стенки влагалища достоверно (p<0,05) повысилось количество нейтрофилов и снизилось количество плазматических клеток по сравнению с интактной группой (табл. 2). В тканях маточного рога достоверно (p<0,05) увеличилась плотность лейкоцитарной инфильтрации (табл. 3). Кроме того, в слизистом и мышечном слоях маточного рога достоверно (p<0,05) повысилось количество нейтрофилов, снизилось количество лимфоцитов и плазматических клеток по сравнению с интактными животными (табл. 3).

Таблица 1

Площадь прелимфатических пространств в тканях влагалища и маточного рога крыс на 5-е сутки воспаления половых органов после лечения антибиотиком.

Примечание: * - значения отличаются от интактной группы при р<0,05

Х - значения отличаются от группы «Модель» при р<0,05

Плотность лейкоцитарной инфильтрации тканей влагалища в группе «антибиотик» достоверно (p<0,05) повысилась в слизистом и в мышечном слое по сравнению с интактными животными, а по сравнению с нелеченным воспалением инфильтрация тканей влагалища была достоверно меньше. В слизистой оболочке влагалища достоверно (p<0,05) снизилось количество плазматических клеток по отношению к интактным крысам, а по отношению к нелеченным животным уменьшилось количество нейтрофилов (табл.2). В тканях маточного рога крыс, получавших антибиотик, плотность лейкоцитарной инфильтрации достоверно (p<0,05) повысилась как в слизистом, так и в мышечном слое, при этом было снижено количество плазматических клеток по отношению к интактным животным. После лечения антибиотиком достоверно уменьшилась инфильтрация слизистого слоя маточного рога по сравнению с группой «модель»(табл.3). В маточном роге крыс, получавших комбинированное лечение (антибиотик + сорбент), лейкоцитарная инфильтрация тканей достоверно (p<0,05) повысилась относительно интактной группы. По сравнению с нелеченным воспалением и животными, пролеченными антибиотиком было достоверно (p<0,05) уменьшено количество нейтро-филов в слизистом слое и повышено количество лимфоцитов в слизистом и мышечном слоях маточного рога (табл.3).

Таблица 2

Плотность лейкоцитарной инфильтрации тканей влагалища крыс половых органов при остром воспалении до и после лечения.

Примечание: * - значения отличаются от интактной группы при р<0,05

Х – значения отличаются от группы «Модель» при р<0,05

Таким образом, при остром воспалении в тканях влагалища и маточного рога увеличивалась площадь прелимфатических пространств и плотность клеточной инфильтрации в тканях с повышением относительного количества нейтрофилов и снижением количества лимфоцитов и плазматических клеток [3,6,10.].

Лечение острого воспаления половых органов антибиотиком приводило к уменьшению выраженности патологических изменений тканей: отека и воспалительной инфильтрации тканей по сравнению с нелеченными животными. В тканях влагалища в составе инфильтрата был снижен процент нейтрофилов и плазматических клеток. В тканях маточного рога в инфильтрате снизился процент плазматических клеток по сравнению с интактной группой и повысился процент макрофагов по сравнению с нелеченным воспалением. Однако, снижение относительного количества плазматических клеток в тканях можно расценить как подавление специфических местных иммунных реакций под действием антибиотикотерапии.

Таблица 3

Плотность лейкоцитарной инфильтрации тканей маточного рога крыс при остром воспалении до и после лечения

Примечание: * - значения отличаются от интактной группы при р<0,05

Х – значения отличаются от группы «Модель» при р<0,05

В условиях комбинированного лечения острого воспаления половых органов в тканях влагалища и маточного рога воспалительные изменения были значительно менее выражены, чем в группе «модель» и «антибиотик», отмечалась активация местных иммунных реакций, выражающаяся в повышении относительного количества лимфоцитов в слизистом и мышечном слое маточного рога, что может указывать на более раннее переключение воспалительной реакции с нейтрофильной фазы и на активацию местных иммунных процессов. Введение сорбента во влагалище способствует разгрузке очага воспаления, улучшению условий жизнедеятельности клеток, снижению токсического действия антибиотика и нормализует продукцию гуморальных факторов и цитокинов острой фазы воспаления [2,5,11-13,15].

В связи с вышесказанным следует признать перспективным направлением разработку комбинированных методов лечения воспалительных заболеваний женских половых органов, направленных на детоксикацию лимфатического региона очага воспаления, чему, в частности, способствует включение в терапевтические схемы нового серебросодержащего сорбента.

Литература

1.          Бородин Ю.И. Лимфология в Сибири: теория, клиника, профилактика.// Бюлл. СО РАМН.-1996.-№2.-С.30-37.

2.          Бородин Ю.И., Деменчук Е.В. и др. Изменения в подвздошном лимфоузле у крыс при асептическом воспалении матки и ее придатков. // Архив анатомии, гистологии, эмбриологии. – 1991. - №9-12. – С.41-45

3.          Галанкин В.Н., Токмаков А.М. Проблема воспаления с позиций теории и клиники.-М., 1991.- 120с.

4.          Дергачева Т.И., Старкова Е.В., Мичурина Г.А. и др. Применение местной сорб-ционной терапии в лечении воспалительных заболеваний матки и придатков у женщин репродуктивного возраста // Проблемы сорбционной детоксикации внут-ренней среды организма.: Труды НИИК и ЭЛ СО РАМН.-1995.-Т.4.-С.89-92.

5.          Дергачева Т.И., Бородин Ю.И., Курганов С.А., Старкова Е.В. Влияние эндотокси-коза на лимфатические сосуды // Проблемы клинической и экспериментальной лимфологии.: Труды ИК и ЭЛ СО РАМН.- Новосибирск, 1996.- Т.5.- С.90-91.

6.          Козинец Г.И., Макаров В.А. (ред.) Исследование системы крови в клинической практике.- М.: Триада-Х, 1997.-480с.

7.          Краснопольский В.И., Буянова С.Н., Щукина Н.А. Гнойная гинекология.- М.: МЕДпресс, 2001.-288с.

8.          Кулаков В.И. Современные принципы антибактериальной терапии в акушерстве, гинекологии и неонатологии // Акушерство и гинекология.-2002.-№4.-С.3-6.

9.          Любарский М.С., Летягин А.Ю., Габитов В.Х. Сочетанная лимфотропная и сорбционная терапия гнойных ран.- Бишкек-Новосибирск, 1995.

10.      Маянский Д.Н. Хроническое воспаление.-М.: Медицина, 1991.- 272с.

11.      Маянский Д.Н., Урсов И.Г. Лекции по клинической патологии.: Руководство для врачей.- Новосибирск, 1997.- 249с.

12.      Семченко Л.Ю., Полуэктов В.Л., Степанов С.С. и др. Обоснование местного применения сорбционно-детоксикационной терапии при послеоперационных гнойно-септических осложнениях у больных колоректальным раком.// Бюллетень СО РАМН.- 2002.-№2.- С.101-104.

13.      Сепиашвили Р.И., Нестерова И.В. Физиология нейтрофильных гранулоцитов и иммунный гомеостаз. // Рос. Физиол. журнал им. И.М. Сеченова.- 2004.- Т.90.- №8.- С. 118.

14.      Старкова Е.В., Дергачева Т.И., Асташов В.В. Способ моделирования воспалительных заболеваний женских половых органов. Патент РФ №2142163 от 27.11.99.

15.      Фрейдлин И.С., Тотолян А.А. Клетки иммунной системы. – СПб.: Наука, 2001.- 390с. – (Т.3; Т.4; Т.5).